XÉT NGHIỆM SOUTHERN BLOT

Xét nghiệm Southern Blot là một kỹ thuật sinh học phân tử được sử dụng để phát hiện một trình tự DNA cụ thể trong một mẫu DNA. Dưới đây là thông tin chi tiết về xét nghiệm này:

Nguyên lý hoạt động:

·                     Phân tách DNA:

o                  DNA được chiết xuất từ mẫu và cắt thành các đoạn nhỏ bằng enzyme giới hạn.

o                  Các đoạn DNA này được phân tách theo kích thước bằng điện di trên gel agarose.

·                     Chuyển DNA lên màng:

o                  Các đoạn DNA đã phân tách được chuyển từ gel lên màng nitrocellulose hoặc nylon.

·                     Lai với đầu dò:

o                  Màng được ủ với một đầu dò DNA đơn sợi có trình tự bổ sung với trình tự DNA mục tiêu.

o                  Đầu dò sẽ lai với trình tự DNA mục tiêu nếu nó có mặt trên màng.

·                     Phát hiện:

o                  Đầu dò được gắn dấu phóng xạ hoặc hóa phát quang, cho phép phát hiện vị trí của trình tự DNA mục tiêu trên màng.

Ứng dụng:

·                     Phát hiện các đột biến gen.

·                     Xác định số lượng bản sao gen.

·                     Phân tích đa hình chiều dài đoạn cắt (RFLP).

·                     Phân tích DNA pháp y.

·                     Nghiên cứu hệ gen.

Ưu điểm:

·                     Độ đặc hiệu cao.

·                     Độ nhạy cao.

Nhược điểm:

·                     Quy trình tương đối phức tạp và tốn thời gian.

·                     Cần lượng DNA mẫu tương đối lớn.

·                     Có những phương pháp hiện đại hơn có thể thay thế trong một số trường hợp.

Các bước thực hiện xét nghiệm Southern blot:

·                     Chuẩn bị DNA mẫu.

·                     Cắt DNA bằng enzyme giới hạn.

·                     Điện di trên gel agarose.

·                     Chuyển DNA lên màng.

·                     Lai với đầu dò.

·                     Phát hiện tín hiệu.

Lịch sử:

·                     Kỹ thuật này được phát minh bởi Edwin Southern vào năm 1975.

Các kỹ thuật tương tự:

·                     Northern blot (phân tích RNA).

·                     Western blot (phân tích protein).

TÀI LIỆU THAM KHẢO

UpToDate 2025